植物总酚（Total Phenols，TP）试剂盒说明书

For Research Use only

仅供研究用

货号：QYS-23062

微量法  100管/48样

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定

植物总酚(TP)含量测定意义：

植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

植物总酚(TP)含量测定原理：

在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在 760nm 处有特征吸收峰，测760nm 处的吸光值，即可得样品总酚含量。

自备实验用品及仪器：

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

植物总酚(TP)含量试剂组成和配制：

提取液：60%乙醇，自备。

试剂一：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

植物总酚(TP)提取：

将样本烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛之后，称取约 0.1g，加入 2.5mL 提取液，用超声提取法进行提取，超声功率 300W，破碎 5s，

间歇 8s，60℃，提取 30min。12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至 2.5mL，待测。

植物总酚(TP)含量测定操作表：

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 760nm，蒸馏水调零。

2、操作表

对照管测定管

样本待测液（µL）1010

试剂一（µL）50

混匀，25℃静置 2min

试剂二（µL）5050

H2O（µL）14090

混匀，25℃静置 10 min，于微量石英比色皿/96 孔板中，测定 760nm 吸光值，ΔA=A 测定-A对照。

植物总酚(TP)含量计算公式：

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 5.615x+0.0012，R² = 0.9994

总酚含量（mg/g ）=（ΔA-0.0012 ）÷5.615×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）= 8.93×（ΔA–0.0012 ）÷W

V 样总：加入提取液体积，2.5 mL； V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样品体积，0.01mL；W：样品质量，g。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 2.808x+0.0012，R² = 0.9994

总酚含量（mg/g ）=（ΔA-0.0012 ）÷2.808×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）= 17.86×（ΔA–0.0012 ）÷W

V 样总：加入提取液体积，2.5 mL； V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样品体积，0.01mL；W：样品质量，g。

注意事项：

1.OD 吸光值大于 2，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。

2.试剂一对皮肤有一定的刺激性，请操作时做好防护措施。

注：电子版说明书仅供参考、具体请参考试剂盒纸质版说明书。

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