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植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒说明书

For Research Use only

仅供研究用

货号:QYS-23060

微量法  100管/96样

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

植物类黄酮(Flavonoid)测定意义

类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。

植物类黄酮(Flavonoid)测定原理

在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在 510nm 处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在 510nm 处的吸光值,即可计算

样品类黄酮含量。

自备实验用品及仪器

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

植物类黄酮(Flavonoid)含量试剂组成和配制

提取液:60%乙醇,自备。

试剂一:液体 1mL×1 管,4℃保存。

试剂二:液体 1mL×1 管,4℃保存。

试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。

植物类黄酮(Flavonoid)提取

将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.02g,加入 2mL 提取液,60℃振荡提取 2h,10000g,25℃,离心 10min,取上清

待测。

试剂盒测定操作表

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 510nm,蒸馏水调零。

2、 操作表

空白管测定管

样本待测液(µL)108

蒸馏水(µL)108

试剂一(µL)66

混匀,25℃静置 6min

试剂二(µL)66

混匀,25℃静置 6min

试剂三(µL)8080

混匀,25℃静置 15 min,测定 510nm 处吸光值。ΔA=A 测定-A 空白,空白管只要做一管。

植物类黄酮(Flavonoid)含量计算公式

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 5.02x+0.0007,R2 = 0.9996

类黄酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷5.02×V 样÷(V 样÷V 样总×W)= 0.398×(ΔA -0.0007)÷W

V 样总:加入提取液体积,2.5mL; V 样:反应中样品体积,0.108mL; W:样品质量,g

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 2.51x+0.0007,R2 = 0.9996

类黄酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷2.51×V 样÷(V 样÷V 样总×W)= 0.797×(ΔA -0.0007)÷W

V 样总:加入提取液体积,2mL;V 样:反应中样品体积,0.108mL;W:样品质量,g

注:电子版说明书仅供参考、具体请参考试剂盒纸质版说书。

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