单宁含量试剂盒说明书

For Research Use only

仅供研究用

货号：QYS-23082

微量法 100管/96样

正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

单宁含量测定意义：

单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物，又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种生理活性，如能与蛋白质、生物碱、多糖结合；能与多

种金属离子发生络合或静电作用； 具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。 

单宁含量测定原理： 

单宁在碱性环境下与磷钼酸反应，生成蓝色化合物，在 760nm 处有最大吸收峰。 

单宁含量试剂盒需自备的仪器和用品： 

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：液体 4mL× 1 瓶，4℃保存； 

试剂二：液体 3mL × 1 瓶，4℃保存； 

单宁的提取：

按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL蒸馏水），充分匀浆后转移到 EP 管中，80℃水浴提取

 30min， 8000  g，25℃离心 10  min，取上清液待测。

单宁含量测定步骤：

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 760nm 处，蒸馏水调零；试剂一和试剂二 37℃预热 10min 以上；

2、操作表：

试剂名称（µL） 对照管 测定管

见详细说明书

混匀，室温静置 30min，760nm 处读取吸光值 A，ΔA=A 测定-A 对照，对照管只要做一管。

单宁含量计算：

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下：

1、标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0132x - 0.0035；x 为标准品浓度(µg/mL)，y 为吸光值。

2、按样本鲜重计算：

单宁含量（µg /g 鲜重）= [(ΔA＋0.0035) ÷0.0132×V1]÷（W×V1÷V2）=75.76×(ΔA＋0.0035)÷W。

3、按样本蛋白浓度计算：

单宁含量(µg/mg prot)= [(ΔA＋0.0035) ÷0.0132×V1]÷(V1×Cpr)=75.76×(ΔA＋0.0035) ÷Cpr。

此法蛋白质含量需另外测定，我司提供三种方法蛋白质浓度试剂盒(QYS-237009)双缩脲法、(QYS-237011)考马斯亮蓝法、(QYS-237013)BCA法。

V1：加入样本体积，0.005mL；V2：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下：

1、标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0066x - 0.0035；x 为标准品浓度（µg/mL），y 为吸光值。

2、按样本鲜重计算：

单宁含量(µg/g 鲜重)=[(ΔA＋ 0.0035)÷0.0066 × V1]÷(W × V1÷V2)=151.52 ×(ΔA＋ 0.0035)÷W。

3、按样本蛋白浓度计算：

单宁含量(µg/mg prot)= [(ΔA＋0.0035)÷0.0066×V1]÷(V1×Cpr)=151.52×(ΔA＋0.0035)÷Cpr。

V1：加入样本体积，0.005mL；V2：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。

注意：最低检测限为 10μg /g 鲜重 或 0. 1μg /mg prot

注：电子版说明书仅供参考、具体请参考试剂盒纸质版说明书。

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