超氧阴离子清除能力试剂盒说明书

For Research Use only

仅供研究用

货号：QYS-23084

微量法 100管/96样

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

超氧阴离子清除能力测定意义

超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起

细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

超氧阴离子清除能力测定原理

AP-TEMED 系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成 NO2－，NO2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在 530nm 处有特征吸收峰，

样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。

超氧阴离子清除能力试剂组成和配制

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 1mL×1 支，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 4mL 蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

试剂四：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

超氧阴离子清除能力样品处理

1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，

取上清置于冰上待测。

2.细胞：按照细胞数量（10⁴ 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1  的比例（建议 500万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，

超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。

3.培养液或其它液体：直接检测。

4.粉剂药物可配制成相同浓度，比如 1mg/mL。

超氧阴离子清除能力测定操作

见详细说明书

充分混匀，37℃显色 20min，于微量石英比色皿/96 孔板，以空白管调零，在 530nm 处测定对照管和测定管的吸光值，分别记为 A 对照管和 A 测定管。

注意：空白管只需测定一次。

超氧阴离子清除能力计算公式

超氧阴离子清除率 I%= (A对照管- A测定管)/A对照管 x 100%

注意事项

1.试剂一 4℃可保存 2 个月，配制好的试剂二 4℃可保存一周，建议实验前配制，并尽快使用。

2.样品处理完后立即进行测定，或者低温保存不超过 24 小时。

注：电子版说明书仅供参考、具体请参考试剂盒纸质版说明书。

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