细胞无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
细胞无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂是一种旨在使用硫酸亚铁氨，在酸性环境下，与游离磷酸根反应，还原产生显色产物钼蓝，呈现吸光峰值的变化，即采用比色法测定离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品的无机磷/游离磷酸根离子的检测。可应用于细胞酶学、结合蛋白成分等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。
技术背景
无机磷/游离磷酸根离子（Phosphate；PO4-3）作为游离离子存在于水资源系统；作为盐类分子存在于陆地环境中、岩矿床上等。由于磷酸根离子没有和生物分子整合，故成为无机磷（inorganic phosphate）。无机磷是陆地和水生植物生长的三大主要营养元素之一，常用于肥料促进农作物生长和发育，也是藻类爆发的原因之一。同时可以用于水质软化剂（water softener）。无机磷/游离磷酸根离子水平检测成为水质和环境健康监测的重要指标。在生物体系中，磷作为骨和牙组织的结构元素，也是生物能量分子例如ATP、ADP、AMP等，以及体内磷酸化酶底物的基本元素。通过检测游离磷酸根水平，反映生物体的磷酸化状况等。基于游离磷酸根离子，在酸性环境下，与硫酸亚铁氨反应，还原产生钼蓝显色产物，呈现吸光峰值的变化，来定量测定无机磷/游离磷酸根离子浓度。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
裂解液（Reagent B） 毫升
缓冲液（Reagent C） 毫升
显色液（Reagent D） 毫升
标准液（Reagent E） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存裂解液（Reagent B）和显色液（Reagent D）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；显色液（Reagent D）具有腐蚀性，避免直接用手接触；有效保证6月
用户自备
15毫升离心管：用于样品处理的容器
1.5毫升离心管：用于样品处理和保存的容器
细胞刮脱棒：用于贴壁细胞脱离
（微型）台式离心机：用于样品收集
培养箱：用于孵育反应物
比色皿或酶标板：用于比色的容器
分光光度仪或酶标仪：用于比色分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。
样品准备及测定步骤见详细说明书
计算样品活性
七、酶标仪测定
1． 在96孔板上做好相应标记：标准样品、待测样品
2． 分别移取100微升上述配制的标准液到相应的标准样品孔里
3． 移取xx微升缓冲液（Reagent C）到待测样品孔里
4． 加入10微升待测样品（总量100微克细胞裂解萃取液蛋白）到待测样品孔里
5． 分别加入xx微升显色液（Reagent D）到所有孔里
6． 轻轻摇动酶标板
7． 在37℃温度下孵育10分钟，避免光照
8． 即刻放进酶标仪检测：获得吸光读数
9． 构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光单位（A）；横座标（X轴）为标准磷浓度（微摩尔/升）
10． 根据标准曲线获得样品对应磷浓度
11． 计算样品活性
注意事项
1． 本产品为20次（比色皿）和40次（酶标板）操作
2． 本产品检测范围为20微摩尔以上
3． 操作时，须戴手套
4． 显色液（Reagent D）具有腐蚀性，避免直接用手接触
5． 样品切忌使用磷酸缓冲液和脱氧胆酸纳处理
6． 比色测定后，比色皿须清洗彻底
7． 如果用户没有660nm波长，可以使用600至660nm的任一波长替代
8． 吸光读数增高，表明具有无机磷/游离磷酸根离子
9． 建议待测样本蛋白浓度为100微克/20微升；如果样本无机磷/游离磷酸根离子浓度过低或过高，则可以增加或降低样本量
10． 本公司提供系列离子检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定检测准确
使用承诺
秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
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